Research Article

Trichophyton sp. Suşundan Keratinaz Üretimi, Saflaştırılması ve Kısmi Karakterizasyonu

Volume: 23 Number: 5 October 31, 2020
EN TR

Trichophyton sp. Suşundan Keratinaz Üretimi, Saflaştırılması ve Kısmi Karakterizasyonu

Öz

Keratinaz aktivitesi gösteren Trichophyton sp. Tr-9 suşu keratin tozu- feather meal içeren minimal besiyerinde büyütürek enzim üretimi gerçekleştirilmiştir. Süpernatanttan Amonyum sülfat çöktürme sonrası, Sephadeks G-100 ve DEAE Sepharose kolon kromatografi uygulamaları ile enzim saflaştırılması yapılmıştır. Maksimum keratinolitik aktivite pH 7.5 ve 37°C’de gözlenmiştir. Enzim pH 5.5-8.0 ve 20°C-40°C sıcaklık aralıklarında stabilite gösterirken, enziminin moleküler ağırlığı SDS page ve zimogram analizlerinde yaklaşık 34 kDa olarak hesaplandı. CaCI2 (5mM) keratinaz aktivitesini (%148) stimüle edici etki gösterdi. Diğer taraftan EDTA (5mM) ve SDS (%1) sırasıyla %49, % 49 etki göstererek kısmen inhibe etti, PMSF (1mM ve 5mM) ile tam inaktivasyon elde edildi. Sonuç olarak, enzimin fiziko-kimyasal özellikleri birçok endüstriyel ve biyoteknolojik uygulamalarda kullanışlı olabileceğini göstermiştir.

Anahtar Kelimeler

Supporting Institution

K.S.Ü. BAP

Project Number

2009/6-4M

Thanks

Bu çalışma KSU Bilimsel araştırmalar birimi tarafından 2009/4-6M Nolu proje ile desteklenmiştir.

References

  1. Anbu P, Hilda A, Sur HW, Hur BK, Jayanthi S 2008. Extracellular keratinase from Trichophyton sp. HA-2 isolated from feather dumping soil. Int Biodeterior Biodegrad 62:287-292.
  2. Apodaca G, McKerrow, JH 1985. Purification and Characterization of a 27,000- Mr Extracellular Proteinase from Trichophyton rubrum. Infect. Immun,57(10): 3072–3080.
  3. Arikan B, Unaldi N, Coral G, Colak O, Aygan A, Gulnaz O 2003. Enzymatic properties of a novel thermostable, thermophilic, alkaline and chelator resistant amylase from an alkaliphilic Bacillus sp. isolate ANT-6. Process Biochemistry, 38:1397-1403.
  4. Asahi M, Lindquist R, Fukuyama K, Apodaca G, Epstein W.L, McKerrow JH 1985. Purification and Charaterization of Major Extracellular Proteinases from Trichophyton rubrum. Biochem. J., 232:139–144.
  5. Balint B, Bagi Z, Toth A, Rakhelye G, Perei K, Kovacs KL 2005. Utilization of Keratin-Containing Biowaste to Produce Biohydrogen. Applied Microbiology and Biotechnology, 69:404-410.
  6. Bernal C, Vidal L, Valdivieso E, Coello N 2003. Keratinolytic Activity of Kocuria rosea. World J. Microbiol. Biotechnol., 19:255–261.
  7. Bernal C, Cairo J, Coello N 2006. Purification and characterization of a novel exocellular keratinase from Kocuria rosea. Enzyme Microbial Technol 38:49–54.
  8. Bhat MK 2000. Cellulases and Related Enzymes Inbiotechnology. Biotechnology Advances, 18:355-383.

Details

Primary Language

Turkish

Subjects

Structural Biology

Journal Section

Research Article

Publication Date

October 31, 2020

Submission Date

January 22, 2020

Acceptance Date

March 13, 2020

Published in Issue

Year 2020 Volume: 23 Number: 5

APA
Parlak, D., Tanış, H., & Aygan, A. (2020). Trichophyton sp. Suşundan Keratinaz Üretimi, Saflaştırılması ve Kısmi Karakterizasyonu. Kahramanmaraş Sütçü İmam Üniversitesi Tarım Ve Doğa Dergisi, 23(5), 1135-1143. https://doi.org/10.18016/ksutarimdoga.vi.678756


International Peer Reviewed Journal
Free submission and publication
Published 6 times a year



88x31.png


KSU Journal of Agriculture and Nature

e-ISSN: 2619-9149